Abstrak Latar Belakang: Neurobiologi dipelajari menggunakan sel neuron dari kultur primer atau menggunakan cell line tergantung pada tujuan penelitian yang akan dilakukan. Berbagai metode dikembangkan untuk mendapatkan sel neuron pada bagian korteks, hipokampus atau dari semua jaringan otak dari otak fetus atau tikus yang baru lahir. Sel neuron tidak mampu berproliferasi sehingga perlu dikembangkan isolasi neuron progenitor cells (NPCs). Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan metode isolasi NPCs dari jaringan utuh otak tikus yang baru lahir secara mudah dan praktis. Metode: Jaringan otak diperoleh dari tikus Sprague Dawley umur 2 hari. Eksperimen dilakukan dalam dua tahap yaitu memasukkan jaringan otak dalam tripsin 0,05% diinkubasi selama 10 menit, menambahkan medium kultur, disaring dengan pori membran dan sentrifugasi selama 10 menit. Tahap selanjutnya membuang supernatan, tambahkan dengan HBSS-glukosa, dimasukkan ke dalam larutan Ficoll 35% dan 65% kemudian sentrifugasi, selanjutnya supernatan ditanam di cawan kemudian dipindahkan lagi pada cawan yang telah dilapisi dengan poly-D-lysine. Karakterisasi dilakukan dengan imunositokimia penanda neuron (NeuN dan microtubule-associated protein 2-MAP2) dan flow cytometry (PSANCAM+ and A2B5-). Hasil: Dalam waktu kurang dari satu jam dengan menggunakan metode ini dapat diperoleh NPCs. Hasil menunjukkan bahwa diperoleh lebih dari 95% sel dengan PSANCAM+ dan A2B5-. Setelah dikultur selama 4 hari, sel positif terhadap NeuN and MAP2. Kesimpulan: Telah berhasil dikembangkan metode isolasi NPCs dari jaringan utuh otak tikus baru lahir yang mudah dan praktis dengan viabilitas dan kemurnian tinggi